最新实验1紫外-可见吸收光谱实验报告

实验一：紫外■可见吸收光谱

实验目的

1-熟悉和掌握紫外■可见吸收光谱的使用方法

用紫外■可见吸收光谱测定某一位置样品浓度

定性判断和分析溶液中所含物质种类实验原理

紫外吸收光谱的波长范围在 200-400，可见光吸收光谱的波长在

400?800,两者都属于电子能谱，两者都可以用朗伯比^（Lamber-Beer-Law）定律来描述

A=￡ be

其中A为吸光度；￡为光被吸收的比例系数；c为吸光物质的浓度，单位mol/L；

b为吸收层厚度，单位cm有机化合物的紫外■可见吸收光谱，是其分子中外层价电子跃

迁的结果，其中包括有形成单键的 幫 c电子、有形成双键的n电子、有C* 未成键的孤对n电子。夕卜层电子吸x 收紫外或者可见辐射后，就从基态r 向激发态（反键轨道）跃迁。主要有 四种跃迁，所需能量圧大小顺序 为 nf >nAn*

0

吸收带

特征

典型幕团

efe *

主要发生在远紫外区

c-c、C-H （在紫外光区观测不到）

跃迁一般发生在150-250nm，因此在紫

nfc*

外区不易观察到

?OH、?NH 2、-X、-S

跃迁吸收带波长较长，孤立跃迁一般发

nfn*

生在200nm左右

芳香环

nfn *

跃迁一般发生在近紫外区（200~400nm ）

C=O、C=s x —k N=O ? 一 N=N —

、C=N ;

三、实验步骤

1、开机

打开紫外■可见分光光度计开矢f开电脑f软件f联接fM （光谱方法）进行调节实验需要

的参数：波长范围 700-365nm

扫描速度高速；采样间隔：0.5 nm

2、甲基紫的测定

（1）校准基线

将空白样品（水）放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准

（2）标准曲线的测定

分别将5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml甲基紫溶液移入比色皿（大

约23处），放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫描，保存

测定试样

将试样甲基紫溶液移入比色皿(大约23处)，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫 描，保存

3、甲基红的测定

校准基线

将空白样品(乙醇)放到比色槽中，点击“基线”键，进行基线校准

测定试样

将试样甲基紫溶液移入比色皿(大约23处)，放到比色槽中，点击“开始”键，进行扫 描，保存

四、实验结果

1 ?未知浓度的测定

分别测定了 5卩g/ml，10卩g/ml，15卩g/ml，20卩g/ml和未知浓度的甲基紫溶液的 紫外吸收光谱，紫外吸收谱图如下：

甲基紫在580nm是达到最大吸收见下表:

浓度/卩g*ml1

吸光度

5

0.665

10

1.274

15

2.048

20

2.659

未知

0.732

各浓度在580nm的吸光度

吸 光 度数据做成散点，结果显示，能很好的拟合直线如下图:

吸 光 度

由计算机计算的拟合直线的尖系为A = 0.135c-0.027

故带入未知浓度的甲基紫溶液的吸光度 0.732得浓度为5.622卩g/ml1 2化合物的定性分

析

已知甲基橙和甲基紫的结构式如下图所示：

NNaO3S屮基橙nh2*

N

NaO3S

屮基橙

nh2*

甲基红

从图中可知，甲基紫约在580nm左右达到吸光度的最大值，而甲基橙溶液在410那么时达到 吸光度最大值，这是由于甲基紫和甲基橙的结构不同造成的，由于甲基紫结构高度共觇，形 成大n键，故最强吸收峰要的波长要比甲基橙的大（红移），同时由于高度共馳，吸光强度也 有所增强。【下载本文档，可以自由复

制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评

和矢注，我将一如既往为您服务】

•  下载文档
•  收藏
•  分享 赏
•  0